Ligase do DNA
Referência : Moreira, C., (2014) Ligase do DNA, Rev. Ciência Elem., V2(1):090
Autor: Catarina Moreira
Editor: José Feijó
DOI: [http://doi.org/10.24927/rce2014.090]
A ligase do DNA (ou DNA ligase) é uma enzima que promove a ligação entre os nucleótidos de duas moléculas de DNA.
Figura 1. Estrutura da enzima ligase do DNA
Em Engenharia Genética e Genética Molecular esta enzima é extremamente importante, dado que esta enzima ajuda a reparar as descontinuidades das moléculas de DNA de cadeia dupla, unindo a cadeia. Por exemplo, as ligases do DNA são utilizadas em conjunto com as enzimas de restrição para inserir fragmentos de DNA em plasmídeos.
Mecanismo de funcionamento da Ligase do DNA
A ligase do DNA forma duas ligações fosfodiester covalentes entre a extremidade 3’ hidroxilo de um nucleótido (“receptor”) com a extremidade 5’ fosfato de outro nucleótido (“dador”). Esta acção requer energia fornecida pelo ATP.
O processo completo decorre em 3 etapas:
- adição de um resíduo de AMP (adenilação) ao centro activo da enzima, e libertação de um pirofosfato
- transferência de AMP para o grupo fosfato 5’ da chamada cadeia dadora, formação de uma ligação pirofosfato
- formação de uma ligação fosfodiester entre o grupo fosfato 5’ do dador e o grupo hidroxilo 3’ do receptor
As extremidades coesivas de dois fragmentos de DNA, obtidos por acção de enzimas de restrição, tendem a emparelhar devido à complementaridade das bases, e a ligação dos fragmentos é feita pela acção da ligase do DNA.
Figura 2. Esquema do emparelhamento entre duas extremidades coesivas sob a acção da ligase do DNA
Referências:
Wikipédia DNA ligase http://en.wikipedia.org/wiki/DNA_ligase
Criada em 16 de Abril de 2011
Revista em 13 de Julho de 2011
Aceite pelo editor em 05 de Janeiro de 2012
