Admin: Criou nova página com 'Referência : Santos, F. L., Fernandes, P. A., Ramos, M. J., (2021) ''Enzima TMPRSS2'', [https://rce.casadasciencias.org Rev. Ciência...'

2021-12-17T10:17:06Z

Criou nova página com 'Referência : Santos, F. L., Fernandes, P. A., Ramos, M. J., (2021) ''Enzima TMPRSS2'', [https://rce.casadasciencias.org Rev. Ciência...'

Nova página

Referência : Santos, F. L., Fernandes, P. A., Ramos, M. J., (2021) ''Enzima TMPRSS2'', [https://rce.casadasciencias.org Rev. Ciência Elem.], V9(4):065
 
Autor: Filipa Leça Santos, Pedro A. Fernandes e Maria João Ramos 
Editor: [[Usuário:Jntavar|João Nuno Tavares]] 
DOI: [[https://doi.org/10.24927/rce2021.065 https://doi.org/10.24927/rce2021.065]] 
<html><a href="https://rce.casadasciencias.org/rceapp/static/docs/artigos/2021-065.pdf" target="_blank">
<img src="https://rce.casadasciencias.org/static/images/layout/pdf.png" alt="PDF Download"></a></html>
----

== Resumo ==

A enzima protease serina transmembranar 2 (TMPRSS2) é um elemento necessário à infeção pelo vírus SARS-CoV-2, o vírus causativo da pandemia COVID-19. A TMPRSS2 é, portanto, um alvo importante para novos fármacos que podem tratar a infeção por SARS-CoV-2.

<html>
Após a Organização Mundial de Saúde declarar a COVID-19 uma pandemia, a 11 de março
de 2020, a vida como se conhece sofreu muitas alterações. Até hoje, a humanidade sofreu
muitas perdas, tendo-se registado, em julho de 2021, cerca de 172 milhões de casos de infeção
por SARS-CoV-2, e destes, 3 milhões não sobreviveram, tornando-se esta pandemia
uma ameaça mundialmente significativa</html><ref><html><a class="a-link" target="_blank"
href=“https://www.worldometers.info/coronavirus/”>https://www.worldometers.info/coronavirus/</a>.</html></ref><html>. Como em qualquer pandemia, a melhor arma
para a combater é a Ciência. Através desta, surgiram as vacinas, que previnem, em média,
quatro a cinco milhões de mortes por ano</html><ref><html><a class="a-link" target="_blank"
href=“https://www.who.int/news-room/facts-in-pictures/detail/immunization”>https://www.who.int/news-room/facts-in-pictures/detail/immunization</a>.</html></ref><html>.

É crucial ter em mente que um vírus, como o SARS-CoV-2, sofre rápidas mutações. Isto
significa que cada vez que o vírus se instala num novo hospedeiro tem uma probabilidade de
sofrer uma mutação, que pode ou não ser mais patológica ou mais infeciosa. Os vírus mutantes
mais contagiosos tornam-se dominantes na população dando origem a novas estirpes
virais. Em apenas um ano de pandemia, já se desenvolveram a estirpe inglesa, a brasileira,
a sul-africana e a indiana. Constata-se pois, que este vírus é propício a mutações e que
apesar do muito esforço e dedicação por parte de todos os investigadores, algumas dessas
alterações genómicas acabam por beneficiar o vírus e, consequentemente, prolongar a sua
permanência na população, com o risco de fazer com que todas as vacinas já criadas e
aprovadas possam vir a ser ineficientes, ou menos eficientes, contra as novas variantes.
Assim sendo, é muito importante controlar a propagação do vírus para que a probabilidade
de mutações seja o mais diminuta possível. Visto isto, quanto mais conhecimento e estratégias
forem adquiridas maior será a vantagem do ser humano no combate à pandemia atual.

Muitos foram os temas já abordados e investigados. No entanto, ainda há vários caminhos
por explorar; um deles é o estudo da enzima protease serina transmembranar 2, mais
conhecida por TMPRSS2. Apesar de esta enzima não pertencer ao SARS-CoV-2, foi constatado
que ela tem um papel fundamental na infeção do hospedeiro, e, por esse motivo,
poderá ser uma potencial via ao combate da pandemia atual.

 

Enzima TMPRSS2

As proteases são enzimas que clivam ligações peptídicas, que são as ligações formadas
entre os aminoácidos que constituem as proteínas</html><ref><html>HEDSTROM, L.,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://pubs.acs.org/doi/10.1021/cr000033x”>Serine protease mechanism and specificity</a>, Chemical reviews, 102, 12, 4501-4524. 2002.</html></ref><html>. O processo é chamado clivagem proteolítica,
um mecanismo comum de ativação ou inativação de enzimas</html><ref><html>HEDSTROM, L.,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://pubs.acs.org/doi/10.1021/cr000033x”>Serine protease mechanism and specificity</a>, Chemical reviews, 102, 12, 4501-4524. 2002.</html></ref><html>.

As proteases serina são endopeptidases — clivam as partes internas das proteínas- e
apresentam um resíduo de serina no centro ativo que atua como nucleófilo. As proteases
serinas são caracterizadas por um centro ativo que contém três aminoácidos altamente
conservados - serina (Ser), histidina (His) e aspartato (Asp) - formando a chamada tríade
catalítica</html><ref><html>SINGH, N. et al.,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7384984/”>Structure-based drug repositioning over the human TMPRSS2 protease domain: search for chemical probes able to repress SARS-CoV-2 Spike protein cleavages</a>, European Journal of Pharmaceutical Sciences, 153,
105495. 2020.</html></ref><html>. Com base na sua preferência para substratos, as proteases serina subdividem-
-se em vários tipos, tais como tipo tripsina ou quimotripsina, entre outros</html><ref><html>SINGH, N. et al.,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7384984/”>Structure-based drug repositioning over the human TMPRSS2 protease domain: search for chemical probes able to repress SARS-CoV-2 Spike protein cleavages</a>, European Journal of Pharmaceutical Sciences, 153,
105495. 2020.</html></ref><html>. A protease
serina transmembranar 2 (TMPRSS2) é uma protease serina transmembranar do tipo II</html><ref><html>KISHK, S. M. et al.,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://www.mdpi.com/1420-3049/25/21/5007”>Molecular Insights into Human Transmembrane Protease Serine-2 (TMPS2) Inhibitors against SARS-CoV2: Homology Modelling, Molecular Dynamics, and Docking Studies</a>, Molecules, 25, 21. 2020.</html></ref><html>,
codificada pelo gene TMPRSS2. Esta enzima pertence ao tipo tripsina e, estas enzimas,
normalmente, clivam ligações peptídicas que envolvem aminoácidos de lisina ou arginina4.

 

Estrutura da enzima TMPRSS2

De acordo com o Universal Protein Resource “UniProtKB” database</html><ref><html>CHIKHALE, R.V. et al.,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32741259/”>Identification of potential anti-TMPRSS2 natural products through homology modelling, virtual screening and molecular dynamics simulation studies</a>, J Biomol Struct Dyn, 1-16. 2020.</html></ref><html>, a enzima TMPRSS2
é constituída por 492 aminoácidos. Contém um domínio transmembranar do tipo II; um
domínio recetor LDL (do inglês low-density lipoprotein) classe A (LDLRA), aminoácidos
112-149, que contém um centro de coordenação para um ião Ca2+; um domínio recetor rico
em cisteína (SRCR), aminoácidos 150-242, que está envolvido na ligação a outras moléculas
na superfície celular ou no meio extracelular; um domínio de protease serina, aminoácidos
256-489, e um local de clivagem, aminoácidos 255-256</html><ref><html>KISHK, S. M. et al.,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://www.mdpi.com/1420-3049/25/21/5007”>Molecular Insights into Human Transmembrane Protease Serine-2 (TMPS2) Inhibitors against SARS-CoV2: Homology Modelling, Molecular Dynamics, and Docking Studies</a>, Molecules, 25, 21. 2020.</html></ref><html>, </html><ref><html>THUNDERS, M. & B. DELAHUNT,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32873700/”>Gene of the month: TMPRSS2 (transmembrane serine protease 2)</a>, Journal of clinical
pathology, 73, 12, 773-776. 2020.</html></ref><html>, que o domínio protease serina
tem de (auto)clivar para que a enzima se torne ativa. O domínio protease serina possui
uma tríade catalítica essencial para a atividade proteolítica constituída pelos aminoácidos
serina441, histidina296 e aspartato345, localizados numa cavidade que liga o substrato e
denominada de centro ativo da enzima</html><ref><html>THUNDERS, M. & B. DELAHUNT,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32873700/”>Gene of the month: TMPRSS2 (transmembrane serine protease 2)</a>, Journal of clinical
pathology, 73, 12, 773-776. 2020.</html></ref><html>.

A região N-terminal da enzima encontra-se localizada no citoplasma e, junto a este, situa-
se o domínio transmembranar hidrofóbico que pode interagir com componentes citoesqueléticos
e moléculas de sinalização, podendo ser importante para o correto transporte
intracelular do péptido</html><ref><html>THUNDERS, M. & B. DELAHUNT,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32873700/”>Gene of the month: TMPRSS2 (transmembrane serine protease 2)</a>, Journal of clinical
pathology, 73, 12, 773-776. 2020.</html></ref><html>. Já os domínios LDLRA, SRCR e o domínio protease serina localizam-
se no espaço extracelular. Os domínios LDLRA e SRCR constituem um domínio denominado
de haste, que pode participar em interações proteína-proteína</html><ref><html>THUNDERS, M. & B. DELAHUNT,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32873700/”>Gene of the month: TMPRSS2 (transmembrane serine protease 2)</a>, Journal of clinical
pathology, 73, 12, 773-776. 2020.</html></ref><html>. O domínio catalítico
cliva recetores de membrana celular, fatores de crescimento, citoquinas e componentes da
matriz extracelular</html><ref><html>THUNDERS, M. & B. DELAHUNT,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32873700/”>Gene of the month: TMPRSS2 (transmembrane serine protease 2)</a>, Journal of clinical
pathology, 73, 12, 773-776. 2020.</html></ref><html>. Este domínio sofre autoclivagem, secreção no epitélio e interage com
as proteínas da superfície celular, a matriz extracelular e as proteínas das células vizinhas</html><ref><html>THUNDERS, M. & B. DELAHUNT,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32873700/”>Gene of the month: TMPRSS2 (transmembrane serine protease 2)</a>, Journal of clinical
pathology, 73, 12, 773-776. 2020.</html></ref><html>.
Na FIGURA 1, pode-se observar um esquema ilustrativo da proteína TMPRSS2.

 
<figure class="image-medium">
<img src="https://rce.casadasciencias.org/static/images/articles/2021-065-01.jpg">
</figure>
<figcaption>FIGURA 1. Esquema da proteína TMPRSS2 com 492 aminoácidos - TM é o domínio transmembranar, LDLRA é o domínio
recetor LDL classe A, SRCR é o domínio recetor rico em cisteína. H, D e S são a tríade catalítica de aminoácidos His, Asp
e Ser, essenciais para a atividade proteolítica.
</figcaption>
 

Em termos de estrutura tridimensional, apenas a estrutura do domínio rico em cisteínas
e domínio protease serina foram determinados na estrutura depositada na base de dados
Protein Data Bank, com o código 7MEQ</html><ref><html>FRASER, B. et al.,
Structural Genomics Consortium (SGC), Crystal structure of human TMPRSS2 in complex with
Nafamostat. 2021.</html></ref><html>. A estrutura terciária destes domínios é constituída
por hélices-α, folhas-β, hélices 3.10, pontes-β, ganchos (em inglês turns) e enrolamentos
desordenados (em inglês random coils) (FIGURA 2A)). Na FIGURA 2B), pode-se observar
a representação de tais domínios.

 
<figure class="image-medium">
<img src="https://rce.casadasciencias.org/static/images/articles/2021-065-02.jpg">
</figure>
<figcaption>FIGURA 2. A) Representação da estrutura secundária dos domínios resolvidos da enzima TMPRSS2: hélices-α a roxo,
folhas-β a amarelo, hélices 3.10 a azul, pontes-β a bronze, ganchos a ciano e enrolamentos desordenados a branco.
B) Representação dos domínios protease serina e rico em cisteínas, e do local de clivagem para auto-ativação da enzima
TMPRSS2. O domínio recetor rico em cisteína a verde, domínio protease serina a vermelho e local de clivagem para auto-
-ativação a amarelo. Os restantes resíduos encontram-se a azul.
</figcaption>
 

A tríade catalítica (His296, Asp345 e Ser441) localiza-se no centro ativo com a Ser441
de um lado e a His296 e o Asp345 do outro lado da cavidade onde se liga o substrato, sendo
esta importante no encaixe do aminoácido a clivar</html><ref><html>KISHK, S. M. et al.,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://www.mdpi.com/1420-3049/25/21/5007”>Molecular Insights into Human Transmembrane Protease Serine-2 (TMPS2) Inhibitors against SARS-CoV2: Homology Modelling, Molecular Dynamics, and Docking Studies</a>, Molecules, 25, 21. 2020.</html></ref><html>. Os resíduos Asp435, Gly462 e Gly472
criam nesta cavidade um local carregado negativamente e a combinação de Ser441,
Gly462 e Gly472 formam uma cavidade hidrofóbica profunda para acomodar aminoácidos
hidrofóbicos do substrato5. A cavidade oxianiónica característica das enzimas proteases
serina é formada por Gly439 e Ser441. O local de ligação do substrato é formado pelos
resíduos Ser460, Trp461 e Gly462, que se espera que formem uma folha antiparalela com
a estrutura de base dos resíduos P1-P3 dos seus substratos</html><ref><html>KISHK, S. M. et al.,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://www.mdpi.com/1420-3049/25/21/5007”>Molecular Insights into Human Transmembrane Protease Serine-2 (TMPS2) Inhibitors against SARS-CoV2: Homology Modelling, Molecular Dynamics, and Docking Studies</a>, Molecules, 25, 21. 2020.</html></ref><html>.. Na FIGURA 3A), é evidenciado
o centro ativo da protease serina e os aminoácidos que formam a cavidade onde se liga a
região clivável do substrato. Esta estrutura é estabilizada por cinco pontes dissulfureto,
onde as pontes formadas por Cys172–Cys231 e Cys185–Cys241 encontram-se no domínio
SRCR e as pontes formadas por Cys281–Cys297, Cys410–Cys426 e Cys437–Cys465
encontram-se no domínio protease serina</html><ref><html>KISHK, S. M. et al.,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://www.mdpi.com/1420-3049/25/21/5007”>Molecular Insights into Human Transmembrane Protease Serine-2 (TMPS2) Inhibitors against SARS-CoV2: Homology Modelling, Molecular Dynamics, and Docking Studies</a>, Molecules, 25, 21. 2020.</html></ref><html>., FIGURA 3B).

 
<figure class="image-medium">
<img src="https://rce.casadasciencias.org/static/images/articles/2021-065-03.jpg">
</figure>
<figcaption>FIGURA 3. A) Centro ativo da protease serina mostrando a tríade catalítica (verde) e aminoácidos que formam a cavidade
de que liga a região clivável do substrato (ciano) e as duas pontes dissulfureto Cys281-Cys297 e Cys437-Cys465 (amarelo).
B) Representação das ligações dissulfureto (amarelo) que são responsáveis pela estabilização da estrutura da proteína.
</figcaption>
 

Função

Em termos de função, a enzima TMPRSS2 tem sido associada a processos fisiológicos e
patológicos tais como digestão, remodelação de tecidos, coagulação do sangue, fertilidade,
respostas inflamatórias, invasão de células tumorais, apoptose e dor</html><ref><html>THUNDERS, M. & B. DELAHUNT,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32873700/”>Gene of the month: TMPRSS2 (transmembrane serine protease 2)</a>, Journal of clinical
pathology, 73, 12, 773-776. 2020.</html></ref><html>. No entanto, a
sua função específica permanece ainda desconhecida</html><ref><html>HOFFMANN, M. et al.,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32142651/”>SARS-CoV-2 cell entry depends on ACE2 and TMPRSS2 and is blocked by a clinically proven protease inhibitor</a>, cell, 181, 2, 271-280. e8. 2020.</html></ref><html>.

 

Papel da enzima TMPRSS2 na infeção viral pelo SARS-CoV-2

Para que o vírus SARS-CoV-2 infete uma célula, a proteína de espícula (do inglês spike)
necessita de se ligar a um recetor da célula hospedeira humana denominado ACE2 (do
inglês Angiotensin Converting Enzyme 2)</html><ref><html>THUNDERS, M. & B. DELAHUNT,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32873700/”>Gene of the month: TMPRSS2 (transmembrane serine protease 2)</a>, Journal of clinical
pathology, 73, 12, 773-776. 2020.</html></ref><html>. Após a ligação entre ambas, há a necessidade
de ocorrer clivagem da proteína de espícula, por parte da enzima TMPRSS2, para
que a fusão entre as membranas celulares viral e hospedeira tenha lugar (FIGURA 4). A
clivagem da proteína de espícula expõe uma região denominada “péptido de fusão”, que
permite a entrada viral. Este processo envolve uma mudança estrutural na proteína de
espícula. Após a entrada, o genoma viral, que tem a forma de RNAmensageiro, é libertado
no citoplasma celular do hospedeiro. Estas alterações conformacionais e o processo
de fusão requerem a ação de proteases celulares, cuja disponibilidade é uma etapa limitadora
de velocidade na entrada do coronavírus</html><ref><html>THUNDERS, M. & B. DELAHUNT,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32873700/”>Gene of the month: TMPRSS2 (transmembrane serine protease 2)</a>, Journal of clinical
pathology, 73, 12, 773-776. 2020.</html></ref><html>. Em particular, as proteases serina
transmembranares do tipo II são ancoradas nas membranas citoplasmáticas e a enzima
TMPRSS2 é uma delas. A protease pulmonar TMPRSS2 cliva a proteína de espícula em
múltiplos locais, para que a fusão entre as membranas celulares viral e hospedeira possa
ocorrer</html><ref><html>GLOWACKA, I. et al.,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://journals.asm.org/doi/10.1128/JVI.02232-10”>Evidence that TMPRSS2 activates the severe acute respiratory syndrome coronavirus spike protein for membrane fusion and reduces viral control by the humoral immune response</a>, J Virol, 85, 9, 4122-34. 2011.</html></ref><html>. Este evento provoca a diminuição da sensibilidade viral à inibição através da
neutralização de anticorpos, ou seja, conferindo resistência ao processo</html><ref><html>GLOWACKA, I. et al.,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://journals.asm.org/doi/10.1128/JVI.02232-10”>Evidence that TMPRSS2 activates the severe acute respiratory syndrome coronavirus spike protein for membrane fusion and reduces viral control by the humoral immune response</a>, J Virol, 85, 9, 4122-34. 2011.</html></ref><html>.

 
<figure class="image-medium">
<img src="https://rce.casadasciencias.org/static/images/articles/2021-065-04.jpg">
</figure>
<figcaption>FIGURA 4. Processo de infeção viral através da interação das proteínas de espícula do vírus SARS-CoV-2 com as proteínas
TMPRSS2 e ACE2, evidenciando a clivagem da proteína de espícula pela TMPRSS2 e a sua interação com ACE2, nos pulmões.
</figcaption>
 

Como a enzima TMPRSS2 subsiste dentro e fora do pulmão, pode contribuir para a propagação
extrapulmonar do vírus, o que justifica uma maior exploração desta enzima como
um potencial alvo para limitar a propagação viral e, consequentemente, a infecciosidade.
De facto, já foram realizados testes in vitro e in silico que demonstraram que a inibição
da TMPRSS2 diminui a infeção da célula hospedeira, e por isso, a comunidade científica
tem insistido na procura e desenvolvimento de inibidores para esta enzima para que estes
possam ser administrados em humanos</html><ref><html>HU, X. et al.,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7781311/”>Discovery of TMPRSS2 inhibitors from virtual screening</a>, bioRxiv, 2020.12.28.424413. 2020.</html></ref><html>, </html><ref><html>PASZTI-GERE, E. et al.,
<a class="a-link" target="_blank"
href=“https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27277342/”>In vitro characterization of TMPRSS2 inhibition in IPEC-J2 cells</a>, Journal of Enzyme Inhibition
and Medicinal Chemistry, 123-129. 2016.</html></ref><html>. Assim, será possível combater a infeção pelo
vírus SARS-CoV-2 de forma eficaz.
</html>

=Referências=
<references/>
---- Criada em 5 de Agosto de 2021 Revista em 23 de Agosto de 2021 Aceite pelo editor em 15 de Dezembro de 2021 
[[Category:Química]]

Enzima TMPRSS2 - História de revisão

Admin: Criou nova página com 'Referência : Santos, F. L., Fernandes, P. A., Ramos, M. J., (2021) ''Enzima TMPRSS2'', [https://rce.casadasciencias.org Rev. Ciência...'